NAD+ IV 使人类血浆中的 NAD+ 水平提高 400%

这项刚刚发表的研究记录了在静脉内 (IV) 输注 750 毫克 NAD+ 期间和之后血浆和尿液中 NAD+ 及其代谢物水平的变化。

一项调查 6 小时静脉输注 NAD+ 期间人体血浆和尿液 NAD+ 代谢组变化的初步研究

令人惊讶的是，直到 2 小时后才观察到血浆 (NAD+) 或代谢物烟酰胺 (NAM)、甲基烟酰胺 MeNAM)、腺苷磷酸核糖核糖 (ADPR) 和烟酰胺单核苷酸 (NMN)] 的变化。

在 6 小时时检测到尿液中 MeNam 和 NAD+ 的排泄增加，但未观察到尿液 NAM 的显着增加。

该研究首次揭示：(i) 以 3 μmol/min 的输注速率

• 至少在最初的 2 小时内，NAD+ 会从血浆中快速完全去除；

• 代谢物的特征与 NAD+ 糖水解酶和 NAD+ 焦磷酸酶活性一致

• 尿液排泄产物包括 NAD+ 本身和 meNAM 但不包括 NAM

增加 NAD+ 水平的最直接方法是通过静脉内 (IV) 给药。

令人惊讶的是，虽然正在积极研究口服 NAD+ 前体，如烟酰胺核糖苷 (NR) 或烟酰胺单核苷酸 (NMN) 对 NAD+ 水平的影响，但这项研究首次展示了 NAD+ 及其代谢物浓度的变化在一组健康男性参与者中静脉输注 NAD+。

11 名年龄在 30-55 岁之间的男性参与者被随机分配到测试组 (n = 8) 或对照组 (n = 3)。测试组的参与者在 6 小时内静脉注射 750 mg NAD+ 生理盐水。

安全性
在 6 小时输注安慰剂（盐水）或测试（NAD+）队列期间，未观察到不良事件。

结果
在 NAD+ 输注开始后 8 小时观察到肝功能酶 GGT、LD 和 AST 的活性显着降低（1.3、57、3.6 单位/L）（表 1）。在安慰剂（生理盐水）处理的样品中，8 小时时任何肝功能标志物的活性都没有明显变化，但是样品数量少可能会降低辨别灵敏度。还观察到血浆胆红素显着增加 2.75 μmoles/L。然而，这些变化都没有被认为具有临床意义。

表 1 – 肝脏

等离子体

• NAD+ 水平在 6 小时时间点增加了 398%

• 相对于基线和盐水处理的对照样品，NAD+ 水平在 8 小时（即输注后 2 小时）时保持升高。

• NAM 在 6 小时时显着增加了 409%

• NAM 水平在 8 小时时恢复到基线

• NAD+ 代谢物 ADPR 在 6 小时时显着增加 393%

• MeNam 在 6 小时时增加到 350%

• NMN 仅在 8 小时时间点升高了 472%

图 1 – 血浆代谢物

尿

• NAD+ 在 6 小时时间点增加了 538%

• 在 8 小时的测试期间，NAM 没有显着变化

• MeNAM 在 6 小时时间点增加 (403%)

图 2 – 尿液代谢物

讨论

重要的是，NAD+ 的输注在测试队列中没有产生任何可观察到的不良事件，而是降低了指示肝应激的酶的血浆活性，例如肝内 LD 和 AST 以及肝后（胆管）酶 GGT，这表明两者的完整性即使在相对较短的 8 小时时间内，肝内和肝后组织也得到增强。

然而出乎意料的是，在 NAD+ 输注参与者中，血浆 NAD+ 水平直到 2 小时时间点后才上升，NAD+ 和代谢物 NAM、meNAM 和 ADPR（分别为 398%、409%、393%）达到基线以上约 400% 的最大值仅在 6 小时时间点（图 1A–E）。这与 NAD+ 和 meNAM 的尿液排泄峰值也发生在 6 小时，然后在输注结束后迅速下降。

血浆 NAM 和 ADPR 的平行上升（相关系数为 1.000，p < 0.001，数据未显示）强烈表明，至少到 6 公顷，NAD+ 的主要命运是通过糖苷 ADPribose-烟酰胺与 NAM 和 ADPR 的裂解进行代谢， NAD 糖水解酶（如 CD38）活性的副产物。这与其他人的证据一致，特别是 CD38 已被证明在控制细胞外 NAD+ 水平方面具有主要作用（Wei 等人，2014 年）。

直到输注前 2 小时后，血浆或尿液中 NAD+ 或代谢物没有任何升高表明 NAD+ 和/或其代谢物被运出细胞外血管空间，并有效地隔离到组织或血管外隔室中，如在此期间的 NAD+ 和/或其代谢物。

虽然存在将外源性静脉注射 NAD+ 快速降解为组成代谢物的显着能力，但还值得注意的是，细胞外 NAD+ 的摄取也可能发生。

由于 NAD+ 具有整体负电荷，因此它无法被动地穿过细胞膜，因此必须主动运输穿过细胞膜。许多研究人员已经证明了这种情况的发生，他们报告说，应用于多种人类细胞类型的外源性 NAD+ 确实会导致细胞内 NAD+ 显着升高

虽然所涉及的机制尚未完全表征，但 Alano 等人。(2010) 报道外源性 NAD+ 可以通过 P2X7 门控通道进入神经元，其他人一直观察到 NAD+ 通过连接蛋白 43 (CX43) 半通道跨膜转运，即使浓度低至 250 pM（Billington 等人，2008）。由于连接蛋白在人体组织中分布广泛，而 CX43 似乎是许多细胞类型中最普遍存在的连接蛋白，因此不能低估快速摄取 NAD+ 的潜力。

因此，至少在前 2 小时，NAD+ 和代谢物 NAM 和 ADPR 以及次级代谢物 meNAM 和 NMN 的细胞摄取和/或代谢似乎与 3 μmoles/min NAD+ 输注同步进行。

NAD+ 和/或测试的主要代谢物在前 2 小时期间被有效隔离，或者次级代谢物也正在形成。

为支持这一假设，其他人已将血液腺苷水平升高视为细胞外 NAD+ 输注的结果。

然而，2 小时后血浆 NMN 的升高也表明外源性 NAD+ 可能受到细胞外 NAD+ 焦磷酸酶的作用，升高血浆 NMN 并释放 AMP 作为额外的代谢物。

总之，这项研究首次揭示：(a) 在 3 μmole/min 的流速下，所有外源性注入的 NAD+ 至少在前 2 小时内从血浆中快速且完全去除；(b) 分析的代谢副产物的增加与 NAD+ 糖水解酶和 NAD+ 焦磷酸酶活性一致；(c) 输注 NAD+ 产生的尿液排泄产物包括天然 NAD+ 和 meNAM，但不包括 NAM。